2.2方法的离色精密度试验
配制6个不同浓度的混标标准溶液,每个浓度各测定6次,谱法其RSD值分别为苯甲酸0.40%~2.12%、测定山梨酸0.35%~2.21%、碳酸添加甜蜜素0.29%~2.96%、饮料研究糖精钠0.47%~2.78%、中种安赛蜜0.61%~2.09%,离色结果见表3。谱法
2.3方法回收率试验
本方法采用加标回收的中种方法进行准确度的评价。取2份已知本底值的离色碳酸饮料样品,分别加入一定量的谱法标准溶液,按上述色谱条件进行测定,测定本试验苯甲酸、山梨酸、甜蜜素和糖精钠选取10μg/ml、20μg/ml和30μg/ml3个加标水平,安塞蜜选取4μg/ml、8μg/ml和12μg/ml3个加标水平,测定结果见表4。苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精钠和安塞蜜的方法回收率分别在96.8%~101.2%、97.0%~101.2%、97.2%~101.7%、98.1%~102.0%和97.3%~100.1%之间,3个加标水平的回收率基本一致,结果见表4。
2.4方法的检出限
分别用标准工作曲线的最低浓度点,按上述色谱条件平行测定6次,得一组低浓度标准峰面积,求出其标准偏差,3倍标准偏差除以方法的灵敏度,即得方法的检出限,分别为:甜蜜素0.40μg/ml,山梨酸0.50μg/ml,苯甲酸0.50μg/ml,糖精钠2.0μg/ml,安赛蜜0.10μg/ml。
2.5本方法测定结果与国标方法测定结果的比较
从市场上抽取了5份碳酸饮料,分别用离子色谱法和国标方法对其中的苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精钠和安赛蜜含量进行了测定,每份测定5次,测定结果见表5。两种测定方法的精密度接近,两种方法测得结果差异无统计学意义(P﹥0.05)。
3讨论
3.1淋洗液浓度的选择
为了使几种成分能很好的分离,我们刚开始采用梯度洗脱,但由于背景电导高,使方法的检出限大大增高,后来我们采用等度洗脱,在10~25mM之间分别进行了测定,淋洗液浓度越低,虽然分离效果还行,但出峰时间拖后,使分析时间延长,淋洗液浓度太高时,虽然出峰时间缩短了,但样品峰与杂质峰分离不太理想,所以最终选择18mM作为淋洗液浓度,在这个浓度时,不但标准成分分离好,而且样品峰与杂质峰分离也比较理想,分析时间也不太长。
3.2干扰试验
考虑到碳酸饮料中还可能添加其他品种的添加剂或含有的其他成分,甜味剂如阿斯巴甜,酸味剂如柠檬酸、苹果酸、酒石酸,以及NO3-和PO43-等它们是否会造成干扰呢?我们在该色谱条件下,对其进行了干扰试验,安塞蜜2.0μg/ml,甜蜜素、糖精钠、阿斯巴甜、山梨酸、苯甲酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸浓度均为20μg/ml,结果在此色谱条件下,阿斯巴甜、柠檬酸、酒石酸、PO43-均不出峰,苹果酸虽然出峰,但出峰时间与目标物质相距甚远,对目标物质不产生干扰,其谱图见图2所示。有文献报道,NO3-有可能对目标物质产生干扰,但在正常情况下是不产生干扰的,只有在NO3-:甜蜜素=155︰1时,才对甜蜜素产生干扰。
3.3定量方式
峰面积和峰高定量是离子色谱法常用的定量方式,具体要用何种定量方式需要考察两个方面,一是峰型差别情况二是线性拟合情况。当样品峰型和标准峰型相同或相近时,峰面积和峰高都有比较好的定量效果,当样品峰型和标准峰型有差距时,峰面积定量相对准确,但有时会引入系统误差。本实验中虽然样品和标准存在一定的基体差别,但两者的峰型基本相同,而且峰面积和峰高的线性拟合情况也不错,所以本方法采用峰面积进行定量。
4结论
通过本次试验,我们建立了一个简单、快速测定碳酸饮料中苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精钠和安赛蜜含量的方法,其方法的精密度、准确度均符合要求;所以该方法适用于碳酸饮料中5种添加剂含量的测定。
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